Рекомбинантты протеин антигендеринде көбүнчө бир нече түрдүү эпитоптор болот, алардын айрымдары ырааттуу эпитоптор, кээ бирлери структуралык эпитоптор.Жаныбарларды денатурацияланган антигендер менен иммунизациялоодон алынган поликлондук антителолор жеке эпитопторго мүнөздүү антителолордун аралашмасы болуп саналат жана жалпысынан табигый структураларды же денатуратталган максаттуу белокторду аныктоо үчүн колдонулушу мүмкүн.Денатуратталган протеиндерди иммуноген катары колдонуунун кошумча артыкчылыгы - денатуратталган белоктор көбүрөөк иммуногендүү болуп, жаныбарларда күчтүү иммундук жоопту стимулдай алат.
Ичерихия таякчасынын экспрессия системасы көбүнчө антигендик максатта тандалат, анткени ал убакыт жана акча жагынан эң кымбат система.Максаттуу протеинди экспрессиялоо мүмкүнчүлүгүн жана тазалоонун ыңгайлуулугун жакшыртуу үчүн кээде максаттуу белоктун белгилүү бир домен сыяктуу кичинекей фрагменти гана экспрессияланат.
Белоктордун үч өлчөмдүү түзүлүшү
Белоктун өзгөчө домени
Эгерде антителолорду даярдоонун максаты жалаң Wb аныктоо үчүн болсо, антиген катары синтетикалык кичинекей пептидди колдонуу үнөмдүү жана тез, бирок пептиддик сегментти туура эмес тандоодон улам алсыз иммуногендүүлүк же регендик эмес болуу коркунучу бар.Антителолорду даярдоо узак убакытты талап кылгандыктан, эксперименттин ийгилигин камсыз кылуу үчүн полипептиддик антигенди колдонуу менен антителолорду даярдоо үчүн эки же үч түрдүү пептиддик сегменттер тандалып алынат.
Иммунизациялоо үчүн полипептиддик антигендин тазалыгы 80%дан жогору болушу керек.Жогорку тазалык теориялык жактан жакшыраак спецификалуу антителолорду алса да, практикада жаныбарлар ар дайым көп сандагы спецификалык эмес антителолорду чыгарышат, ошентип антиген тазалыгынын артыкчылыктарын жашырышат.
Мындан тышкары, кичинекей пептиддерден антителолорду даярдоо анын иммуногендүүлүгүн жогорулатуу үчүн тиешелүү ташуучу антиген менен кайчылаш байланышта болушу керек.Эки жалпы антигендик ташыгычтар KLH жана BSA болуп саналат.
Посттун убактысы: 23-март-2023