Биологиялык изилдөөлөрдө адатта узун ырааттуу полипептиддер колдонулат.Кезектеги 60тан ашык аминокислотадан турган пептиддер үчүн аларды алуу үчүн көбүнчө ген экспрессиясы жана SDS-PAGE колдонулат.Бирок, бул ыкма көп убакыт талап кылынат жана акыркы продукт бөлүү таасири жакшы эмес.
Узак пептиддердин синтези үчүн кыйынчылыктар жана чечимдер
Узун пептиддердин синтезинде биз дайыма бир маселеге туш болобуз, башкача айтканда, конденсация реакциясынын стерикалык тоскоолдугу синтездеги ырааттуулуктун жогорулашы менен көбөйөт жана реакциянын толук болушу үчүн реакция убактысын тууралоо керек.Бирок реакция убактысы канчалык узак болсо, ошончолук терс таасирлер пайда болуп, максаттуу пептиддин бир бөлүгү түзүлөт.Мындай калдыктар - жетишсиз пептиддик чынжырлар узак пептиддик синтезде өндүрүлгөн негизги аралашмалар болуп саналат.Ошондуктан, узун пептиддерди синтездөөдө, биз чечишибиз керек болгон негизги маселе - аминокислота конденсация реакциясын кеңири жана толук кылуу үчүн жогорку сапаттагы реакция шарттарын жана реакция ыкмаларын изилдөө.Мындан тышкары, реакция убактысын кыскартыңыз, анткени реакция убактысы канчалык узак болсо, контролдонууга мүмкүн болбогон кошумча реакциялар, кошумча продуктулар ошончолук татаал болот.Ошондуктан, төмөнкү үч пункт жалпыланган:
Микротолкундар синтези колдонулушу мүмкүн: Интеграциялоо оңой болбогон кээ бир аминокислоталардын синтез процессинде кездешүүсү үчүн микротолкундуу синтез колдонулушу мүмкүн.Бул ыкма укмуштуудай натыйжаларга ээ жана реакция убактысын бир топ кыскартат жана эки негизги кошумча продуктунун пайда болушун азайтат.
Фрагменттерди синтездөө ыкмасын колдонсо болот: Кээ бир пептиддерди жалпы синтез методдору менен синтездөө кыйын жана тазалоо оңой болбосо, биз пептиддин белгилүү бир сегментиндеги бир нече аминокислоталардын бүт конденсациясын бүтүндөй пептиддик чынжырга кабыл алабыз.Бул ыкма синтездеги көптөгөн маселелерди да чече алат.
Acylhydrazide синтези колдонулушу мүмкүн: пептиддердин acylhydrazide синтези пептиддик байланыш ыкмасына жетүү үчүн амиддик байланыштарды түзүү ортосундагы N-терминал Cys пептид жана C-терминал полипептид гидразид химиялык тандалма реакция катуу этап синтези ыкмасы болуп саналат.Пептиддик чынжырдагы Cys абалына таянып, бул ыкма бүт пептиддик чынжырды бир нече ырааттуулукка бөлүп, тиешелүүлүгүнө жараша синтездейт.Акыр-аягы, максаттуу пептид суюк фазалык конденсация реакциясы аркылуу алынат.Бул ыкма узак пептиддердин синтез убактысын гана кыскартпастан, акыркы продуктунун тазалыгын да кыйла жогорулатат.
Узак пептиддик тазалоо
Узун пептиддердин өзгөчөлүгү сөзсүз түрдө чийки пептиддердин татаал компоненттерине алып келет.Ошондуктан, ошондой эле HPLC менен узак пептиддерди тазалоо үчүн кыйынчылык болуп саналат.полипептиддерди тазалоо процессинин амилоиддик сериясы, көп тажрыйбаны өзүнө сиңирип, узак пептидди тазалоодо ийгиликтүү колдонулат.Жаңы жабдууларды кабыл алуу, бир нече тазалоо системаларын аралаштыруу, кайталап бөлүү жана башка тажрыйба ыкмалары, узак пептиддик тазалоонун ийгилиги бир топ жакшырды.
Посттун убактысы: 18-апрель-2023